树突状细胞(Dendritic Cell,DC)被认为是已知功能最强的抗原递呈细胞(APC)。一颗DC能够激活100至3000个T细胞,其能力是巨噬细胞和B细胞的100至1000倍。DC通过处理肿瘤抗原并将其呈递给T细胞,显著刺激初始T细胞的增殖,而其他类型的APC(如巨噬细胞、B细胞)只能刺激已激活或记忆的T细胞。
目前,在体外培养DC的主要方式是利用细胞因子从骨髓、外周血和脐带血的DC前体进行定向诱导。由于骨髓和脐带血的取样较为困难,外周血因其取材简单且不需复杂的筛选和纯化过程,成为临床获取DC的较佳选择。
在传统DC疫苗流程中,采用GM-CSF与IL-4促进单核细胞向“大巨噬样细胞”分化。IL-4能够抑制DC前体向CD14+巨噬细胞分化,而进一步诱导其转变为CD14-/CD1a-的初始DC(iDC)。在此阶段,虽然iDC具有较强的抗原摄取和加工能力,但其递呈能力较弱,MHCⅠ、Ⅱ类分子及B7家族分子的表达较低。
随后,通过TNF-α和IL-1β的协同作用,激活NF-κB信号通路以促进DC成熟(CD1a+/CD83+)。IL-6与PGE2则进一步提高DC的产量、成熟度以及迁移能力,使其在抗原递呈中变得更为高效。
在实验室中,通过Ficoll梯度离心法从全血中提取外周血单个核细胞(PBMC),然后采用贴壁法或磁珠法富集CD14+单核细胞。继续培养时,需注意细胞在不同阶段的变化,以推动DC的高效培养过程。
为了反映DC的成熟状态及其功能特征,常使用流式细胞检测方法分析CD14、HLA-DR、CD1a/CD83、CD40/80/86以及DC-SIGN等分子。此外,监测与人DC的免疫调节功能相关的细胞因子如IL-12p70、IL-10和IL-1β,对于全面评估DC的功能至关重要。
在此背景下,尊龙凯时提供了科研级和GMP级细胞因子,以支持DC的高效、稳定、合规培养。这些高活性、低内毒素的细胞因子可确保DC在体外诱导培养中的一致性和有效性。
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